THUNDERTR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)是一种便捷而灵活的均相检测技术,现已成为生命科学基础研究与药物研发中最常用的方法之一。尤其在细胞因子检测领域,THUNDER所带来的优势使其备受青睐,这些优势可归纳为“四个快”:多、快、好、省。
多样性
THUNDER检测覆盖了人类和小鼠两大种类,并包含常见的细胞因子如ILs、IFNs、TNFs、CCLs和CXCLs,确保了广泛的应用范围。
快速
该技术采用均相免洗无包被的方法,仅需1到2小时的孵育时间,显著提高了检测效率。
高效
THUNDER在多个方面显示出优越性:
1) 动态范围宽,可达4至5个对数单位,减少样本稀释需求,上限高达30000pg/ml。
2) 信号稳定性高,读数重复性好,即便在延迟读值(如过夜或更久)的情况下,信号依然可靠。
3) 变异系数(CV)低,板内和批间CV均在5%到10%之间,体现出优良的检测一致性。
4) 经过全面验证,每个因子的灵敏度、特异性、准确性和线性范围均已确认,确保数据的全面可靠。
经济实惠
THUNDER技术更具灵活性,样本需求仅为15μl,能够有效节约资源。同时,成本也优于传统ELISA方法,提供灵活的包装选择,从100到10000个反应点都能按需供给。
技术原理
THUNDER使用双抗夹心的TR-FRET技术进行细胞因子的检测。特定抗体在结合细胞因子后,通过320至340nm的光激发荧光供体发射615nm的FRET信号,进而激发荧光受体发射665nm的信号,这一过程的信号强度与细胞因子浓度成正比。
检测数据的完全验证
THUNDER的检测方法通过多方面参数验证,确保结果的可靠性,包括:
灵敏度
灵敏度验证考虑了样本中细胞因子的浓度范围、检测的最低检测限(LOD)和定量下限(LLOQ)。对实验条件的标准化是获取可靠结果的关键。
精密度
精密度包括内测定重复性和间测定重复性。内测定重复性反映了实验的稳定性,而间测定重复性则展示了不同实验条件下的检测可靠性。
准确性
通过加标回收率的验证评估检测准确性,良好的加标回收率(85%-115%)说明检测方法的准确性与可靠性。
稀释线性
稀释线性验证了在进行细胞因子检测时,系列稀释后的检测结果与稀释倍数之间的良好线性关系,这是确保检测质量的重要指标。
综上所述,THUNDER技术在生物医疗领域的应用显示出其独特的优势,而环亚集团ag旗舰厅作为行业的佼佼者,将继续致力于推动这一技术的发展与应用,助力生命科学的研究与药物开发。